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随着造血干细胞移植技术等新的医疗手段在临床的广泛应用,输血相关移植物抗宿主病(TA-GVHD)被引起极大关注。因其临床表现缺乏特异性,极易漏诊和误诊并且病死率高达80%~90%,所以该病主要以预防为主[1]。国外从70年代发现γ、X射线辐照可以有效地破坏淋巴细胞活性,从而射线辐照血液被认为是一种预防TA-GVHD的唯一可靠方法。至于辐照血液的质量,目前国内外并无统一标准,一般遵循最大程度地灭活血液制品中的淋巴细胞(特别是T淋巴细胞),最低限度地减少有效血液成分的损伤为原则。

材料和方法

仪器　①血液辐照仪　Biobeam 8000德国STS公司。放射源为137Cs,活度117 TBq。中心剂量为2.93Gy/min,剂量率波动动幅度为+28%~-8.5%。试验参数设置以2.93Gy/min为标准,分别设置中心辐照剂量为10、25、35、45Gy。辐照杯为180°旋转,速度为20转/min,放射源上下运行距离为238mm,在0 mm和238 mm处分别滞留19%;②液体闪烁谱仪(1209-Rackbeta);③全自动血细胞分析仪(COULTER JTIR);④全自动生化分析仪(OLYMPUSAU400);⑤酸度计(BECKMANΦ50 pH Meter);⑥紫外分光光度计(岛津UV2000)。

血标本制备　采血400ml/U(CPDA)全血为一例,每例标本均分装于5个塑料袋中,分别为未辐照(对照组)和10、25、35、45 Gy不同剂量的辐照组。

淋巴细胞增殖检测　采用核素标记3H-TdR参入法[2]。标本为15例,采血当日每例标本按1•2方法制备成5组,辐照后即刻用淋巴细胞分离液分离淋巴细胞,最终浓度为1×106/ml。每份标本用Con-A(sigma)作有丝分裂原刺激(刺激组)和未刺激(对照组),分别于37℃培养56h后,参入3H-TdR (中国原子能科学院提供),16h终止。测定其cpm值,计算增殖指数。增殖指数=[(Con-A有丝分裂原)刺激组(cpm)-(未刺激)对照组(cpm)]/对照组(cpm) 每例标本以未辐照(对照组)的增殖指数为100%,计算其增殖率。　　增殖率=辐照组(不同剂量)的增殖指数/未辐照(对照组)增殖指数×100%

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