关于清喉消炎颗粒的薄层色谱鉴别

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2017-06-27 14:52:00

关于清喉消炎颗粒的薄层色谱鉴别

【摘要】目的建立清喉消炎颗粒的薄层色谱鉴别方法。方法采用薄层色谱法对清喉消炎颗粒中的板蓝根、地胆草、甘草等药材进行了鉴别。结果薄层色谱法能清晰地鉴别清喉消炎颗粒中的板蓝根、地胆草、甘草，阴性无干扰。结论建立的薄层色谱法操作简单，斑点清晰,分离度好，重现性好，可作为清喉消炎颗粒的质量控制方法。

【关键词】清喉消炎颗粒;薄层色谱;板蓝根;地胆草;甘草

清喉消炎颗粒是由板蓝根、地胆草、甘草等中药组成。该制剂是按医院协定的处方改革而得到的新剂型，具有清热解毒、凉血利咽的功效。关于清喉消炎颗粒的薄层色谱鉴别，可用于咽喉肿痛等症状。本文对清喉消炎颗粒处方中的板蓝根、地胆草、甘草等中药进行了薄层鉴别，从而为其质量控制提供必要的依据。

1、仪器与试药

1.1 仪器

ZF?90型暗箱式紫外透射仪(上海顾村电光仪器厂)，定量点样毛细管,国产薄层预制G板(青岛海洋化工厂分厂)，国产薄层预制GF254板(青岛海洋化工厂分厂)。

1.2 试药

板蓝根药材、甘草药材、地胆草药材均由广东药学院药用植物学教研室李书渊教授鉴定;靛玉红对照品(中国药品生物制品检定所， 717?9402);甘草次酸对照品(中国药品生物制品检定所，723?200109);清喉消炎颗粒(规格为10 g/袋，批号为20060601，20060602，200606030)、板蓝根阴性对照样品、地胆草阴性对照样品、甘草阴性对照样品均由广州医学院第二附属医院提供，其余试剂均为分析纯。

2、实验部分

2.1 板蓝根的薄层鉴别

取本品颗粒50 g，加入硫酸钠饱和的水溶液80 mL溶解，转移至分液漏斗中，用乙醚振摇提取3次，每次30 mL，合并乙醚液，用质量分数为1%的氢氧化钠溶液洗涤3次，每次30 mL，再用水洗涤3次，每次30 mL，取乙醚液，水浴上蒸干，残渣加二氯甲烷约0.5 mL使其溶解，作为供试品溶液。另取板蓝根对照药材6 g，加无水乙醇适量，加热回流1 h，滤过，滤液于水浴上蒸干，残渣加入硫酸钠饱和的水溶液20 mL溶解，同法制成对照药材溶液。取板蓝根的阴性样品，同法制成阴性对照溶液。另取靛玉红0.3 mg加2 mL二氯甲烷溶解，作为对照品溶液。

吸取供试品溶液、阴性对照溶液、对照药材溶液各10 μL，对照品溶液2 μL，分别点于同一以0.3%羧甲基纤维素纳为黏合剂的硅胶G薄层板上，以甲苯?二氯甲烷?丙酮(体积比5∶4∶1)为展开剂，展开，展距约为7.3 cm。取出，晾干，日光下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的红色斑点，而阴性对照色谱在相应的位置上无斑点。见图1。

2.2 地胆草的薄层鉴别

称取本品颗粒30 g，加水60 mL溶解，用三氯甲烷萃取3次，每次30 mL,合并三氯甲烷液，水浴上蒸干，残渣加无水乙醇2 mL使其溶解，作为供试品溶液。另取地胆草药材4 g，加体积分数60%乙醇60 mL，水浴上加热回流1 h,滤过，滤液除去乙醇后，用乙酸乙酯振摇提取2次，每次30 mL，合并乙酸乙酯液，用适量无水硫酸钠脱水后，过滤，水浴上蒸干，残渣加无水乙醇2 mL使其溶解，作为对照药材溶液。再取地胆草的阴性样品，同供试品溶液方法制成阴性对照溶液。

吸取上述3种溶液各2 μL,分别点于同一以0.3%羧甲基纤维素纳为黏合剂的硅胶G薄层板(厚500 μm)上，以环己烷?丙酮?乙酸乙酯(体积比5∶3∶1)为展开剂，展开，展距约为7 cm。取出，晾干，在紫外光灯(365 nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的蓝色斑点，而阴性对照色谱在相应的位置上无斑点。见图2。

2.3 甘草的薄层鉴别

称取本品颗粒20 g，加入硫酸?体积分数45%乙醇溶液(取硫酸7 mL，加体积分数45%乙醇稀释至100 mL即得)约60 mL，加热回流1 h。放冷，滤过，滤液用石油醚(60～90 ℃)萃取2次，每次50 mL，合并石油醚液，水浴上蒸干，残渣加无水乙醇1 mL使其溶解，作为供试品溶液[1]。取甘草对照药材2 g、甘草的阴性样品10 g，同法制成甘草对照药材溶液和甘草阴性样品溶液。另取甘草次酸对照品适量，加入无水乙醇溶解，配成质量浓度为1 mg/mL的对照品溶液。

吸取供试品溶液溶液、阴性对照溶液各5 μL，对照药材溶液3 μL，甘草次酸对照品溶液1 μL，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以石油醚(30～60 ℃)?甲苯?乙酸乙酯?冰醋酸(体积比10∶20∶10∶0.5)为展开剂，展开，展距约为7 cm。取出，晾干，在紫外光灯(254 nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，而阴性对照色谱在相应的位置上无斑点。见图3。

3、讨论

3.1 在中国药典中，板蓝根的薄层鉴别是以精氨酸作对照品，结果发现，供试品色谱中找不到精氨酸鉴别斑点。通过条件摸索，可以采用板蓝根另一成分靛玉红进行鉴别[2]，结果斑点清晰，阴性不干扰。

3.2 甘草的薄层鉴别，通常采用甘草酸铵作为对照品，结果发现，阴性样品在甘草酸铵对照品色谱相应位置有干扰，经反复摸索，也不能排除干扰;对样品进行水解，结果发现供试品色谱中，甘草次酸鉴别斑点明显，分离度好，阴性无干扰。

3.3 薄层鉴别的条件耐用性实验中，板蓝根、甘草的薄层鉴定在湿度RH20%和RH75%以及在冰箱(4～10 ℃)中，鉴别斑点的位置无多大变化。因此湿度、温度变化基本不影响板蓝根、甘草的薄层鉴别。关于清喉消炎颗粒的薄层色谱鉴别，地胆草的薄层鉴定在湿度RH20%和RH75%展开所得到的鉴别斑点的Rf值无多大变化，但在冰箱(4～10 ℃)中得到的鉴别斑点的Rf值略有升高，可见温度对其Rf值有一定影响。