果实所积累糖的种类、含量及比率是决定其品质及商品价值的重要因素。近几年众多研究结果表明,可溶性糖不仅作为代谢基质为植物发育提供能量和中间产物, 详细内容请看下文浅谈外源糖对苹果果实的影响。
山梨醇作为苹果光合同化产物的主要输出和运输形式,在苹果果实内可被迅速转化。山梨醇脱氢酶(SDH)和山梨醇氧化酶(SOX)是参与山梨醇代谢的关键酶,其中SDH将山梨醇还原成果糖,SOX将山梨醇氧化成葡萄糖。发育过程中,苹果果实SDH和SOX活性变化与可溶性糖含量间的关系尚不清楚。
材料和方法
1.1 材料
试验于2009─2010年在青岛农业大学果树试验中心进行。以12年生新红星(Malus domestica Borkh. cv. Starkrimson)为试材,树势中庸,生长发育正常,常规田间管理。从花后间隔15 d取样1次,每次随机取50个果实,果肉用液氮速冻后置-80 ℃超低温冰箱贮存备用。分别在花后50 d和100 d进行外源糖孵育试验。
1.2方法
可溶性糖的测定葡萄糖、果糖和蔗糖的测定采用高效液相色谱法(HPLC)。柱温40 ℃,流速2 mL/min,RID示差检测器;流动相为乙腈∶水=83∶17,每次进样体积为20 μl,根据样品峰面积和标准曲线计算蔗糖、葡萄糖和果糖含量。
果实圆片试验参照Beruter等的方法略有改动。将花后50 d和100 d的果实分割成直径1.0 cm,厚0.1 cm的圆片,在平衡缓冲液中平衡30 min后进行外源糖孵育试验。取5 g果肉圆片与20 mL分别加入浓度为100 mmol·L-1的葡萄糖、果糖、山梨醇、蔗糖的MES缓冲液混合(用100 mmol·L-1甘露醇调节各反应液的渗透势),放入50 mL的三角瓶中,在摇床上振荡反应16 h(25 ℃),测定SDH和SOX的活性。3次重复。
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